Bèta-actine-antilichaam – Een controle die er toe doet
bèta-actine – een huishoudeiwit
Waarom wordt bèta-actine vaak gebruikt als controle in Western blots?
bèta-actine en ziekten bij de mens
Gerelateerde producten
bèta-actine – een huishoud-eiwit
Actine is een belangrijk onderdeel van het cytoskelet, met zes bekende isovormen bij zoogdieren. Vier van deze isovormen komen voornamelijk tot expressie in gestreepte en gladde spiercellen, terwijl bèta-actine en gamma-actine isovormen alomtegenwoordig zijn. Hoewel beta-actine een molecuulgewicht van 42 kDa heeft, zal degradatie 35-38 kDa, ~ 30 kDa, 15 kDa, en andere typische fragmenten produceren op een Western blot, waarvan 35-38 kDa fragmenten de meest voorkomende zijn.
Proteintech’s monoklonale beta-actine antilichaam (60008-1-Ig) (figuur 1) herkent alle fragmenten, terwijl 66009-1-Ig antilichaam (figuur 2) alleen de volledige lengte van beta-actine kan detecteren. Bèta-actine is in hoge mate geconserveerd tussen soorten. De N-terminale sequentie is echter minder geconserveerd tussen soorten dan de C-terminus. Aangezien het immunogeen voor 60008-1-Ig de interne sequentie is, kan dit antilichaam een breed scala van diersoorten herkennen en breed in onderzoek worden ingezet.
| Figuur 1 | Figuur 2 |
 |
 |
| Figuur 2. Immunohistochemie van in paraffine ingebed menselijk colonkankerweefselglaasje met 66009-1-Ig (beta-actine-antilichaam) bij een verdunning van 1:1000 (onder 40x lens). Hitte-gemedieerd antigeen opgehaald met Tris-EDTA buffer(pH9). |
Waarom wordt beta-actine gewoonlijk gebruikt als controle in Western blots?
Lading controles zijn essentieel voor een juiste interpretatie van Western blots. Ze kunnen worden gebruikt om de niveaus van het gedetecteerde eiwit te normaliseren door te bevestigen dat de belading van het eiwit overal op de gel gelijk is. Bij Western blotting wordt beta-actine (42 kDa) vaak gekozen als ladingscontrole vanwege de brede en consistente expressie in alle eukaryotische celtypen en het feit dat de expressieniveaus van dit eiwit niet worden beïnvloed door de meeste experimentele behandelingen (figuur 3).Beta-Actine fungeert als een “ladingscontrole” om aan te tonen dat zeer vergelijkbare hoeveelheden eiwit in elke rijstrook werden geladen. Dit is essentieel in sommige experimentele systemen waar het misschien niet mogelijk is om altijd precies hetzelfde aantal cellen te verzamelen voor elk monster, zoals bij het werken met primaire cellen, weefselmonsters, of systemen waar u de eiwitsynthese, celgrootte/aantal, of apoptose kunt veranderen (1).
Figuur 3
Figuur 3. Western blot-analyse van bèta-actine in diverse weefsels en cellijnen met behulp van Proteintech-antilichaam 66009-1-Ig bij een verdunning van 1:20000 (belichtingstijd: 10 seconden).
bèta-actine en ziekten bij de mens
Bèta-actine is door proteomics betrokken bij hand-, voet- en mondziekte en bij groot diffuus B-cel-lymfoom (3, 4).
Gerelateerde producten:
| Antigeennaam | Catalogus Nr |
Toepassing |
PubMed |
| alpha Actin | 23660-1-AP | ELISA, WB, IHC, IF, IP | 5 |
| 11032-1-AP | ELISA, WB, IP | 1 | |
| 23082-1-AP | ELISA, IHC, WB | 1 | |
| 66125-1-Ig | ELISA, WB, IHC | 0 | |
| smooth muscle actin | 14395-1-AP | ELISA, IHC, IP, WB, FC, IF | 51 | 23081-1-AP | ELISA, WB, IHC, IP | 5 |
| 55135-1-AP | ELISA, IHC, WB | 4 | |
| 11227-1-AP | ELISA, WB | 0 |
| Geparfumeerde eiwitladders voor uw WB-experimenten | ||
| Gereed-te gebruiken eiwitmarker (10-180 kDa) | Klaar te gebruiken breed-bereik eiwitmarker (3-245 kDa) | |
| 10 voorgekleurde eiwitten die een breed scala aan molecuulgewichten van 10 tot 180 kDa omvatten | 13 voorgekleurde eiwitten die een breed scala aan molecuulgewichten van 3 tot 180 kDa omvatten | 13 voorgekleurde eiwitten die een breed scala aan van moleculaire gewichten van 3 tot 245 kDa |
 |
 |
|
| Resolutie van de voorgekleurde eiwitladder in een 10-20% Tris-glycine gel (SDS-PAGE). | Oplossing van de voorgekleurde eiwitladder in een 4-12% Bis-Tris gel (SDS-PAGE) | |
Gratis monsters beschikbaar voor standaardbereik eiwitmarker (10-180 kDA).