Discussie
Dit rapport beschrijft immunoreactiviteit tegen spierantigenen – waaronder desmin, α-SMA en myogenine – in canine liposarcoom. Er zijn zeldzame meldingen van immunoreactiviteit van liposarcomen voor spiermarkers bij dieren.8,19 Skeletspieren en wit vet hebben mogelijk een gemeenschappelijke embryologische oorsprong, en het is mogelijk dat immunoreactiviteit van adipocytaire tumoren voor spiermarkers deze gemeenschappelijke mesenchymale oorsprong weerspiegelt.28 Deze informatie is relevant voor veterinaire pathologen, want als liposarcomen bij de hond immunoreactief kunnen zijn voor spiermarkers, kunnen deze neoplasma’s verkeerd gediagnosticeerd worden als rhabdomyosarcoom, vooral bij slecht gedifferentieerde neoplasma’s. Dit heeft prognostische implicaties aangezien rhabdomyosarcoom bij de hond typisch een kwaadaardiger neoplasma is en niet wordt gegradeerd volgens het standaard STS-graderingsschema.7 Hoewel moeilijk te kwantificeren in de literatuur, is het de ervaring van de auteurs dat sommige cellen vacuolated kunnen zijn in een aantal neoplasma’s, en dit kan de verdenking van een adipocytenneoplasma doen rijzen en wijzen op de noodzaak van IHC in de diagnose. Histomorfologie alleen wordt voldoende geacht voor de diagnose liposarcoom bij goed gedifferentieerd liposarcoom, pleomorfe liposarcomen waarbij ≥50% van het neoplasma uit lipoblasten bestaat, en gedifferentieerd liposarcoom waarbij ≥50% van het neoplasma goed gedifferentieerd is.16 Voor de overige gevallen (d.w.z. alle myxoïde liposarcomen, pleomorfe liposarcomen waarbij <50% van het neoplasma uit lipoblasten bestaat, en gedifferentieerd liposarcoom waarbij <50% van het neoplasma goed gedifferentieerd is) kunnen IHC en lipidenkleuren nodig zijn om een definitieve diagnose te stellen.
Desmin en α-SMA werden in deze studie geselecteerd omdat dit de meest gerapporteerde spiermerkers zijn die bij pleomorfe liposarcomen bij de mens immunoreactief zijn.14 Onze resultaten geven aan dat dit ook geldt in canine liposarcomen als desmin en α-SMA actine waren de meest frequent tot expressie gebrachte spier markers in deze studie. Desmin wordt vaak beschouwd als een spier-specifiek antigeen, maar recent onderzoek heeft de relatief lage specificiteit ervan aangetoond.4,14 Deze en eerdere studies hebben immunoreactiviteit voor desmin gerapporteerd in verschillende humane en canine niet-musculaire neoplasma’s, waaronder osteosarcoom, liposarcoom, lipoblastoom, lipoom, en hemangiopericytoom.2,14,19,21,28 De literatuur over de specificiteit van α-SMA varieert, waarbij sommige rapporten aangeven dat het specifiek is en nuttig voor het differentiëren van neoplasmata van myogene oorsprong, en andere suggereren dat de specificiteit beperkt is.6,19,28 De resultaten in dit onderzoek komen overeen met eerdere rapporten van matige specificiteit van α-SMA, aangezien 28% van de liposarcomen immuunreactief was voor deze marker. Myogenine wordt over het algemeen beschouwd als een meer specifieke en gevoelige marker voor spierspecifieke neoplasie dan α-SMA of desmin.4,5 In verband met de hoge specificiteit is myogenine slechts sporadisch als sporadisch immunoreactief gemeld in niet-musculaire spoelcelneoplasma’s bij mensen.5 Dit wordt ondersteund door bevindingen in deze studie, waarin myogenine de minst voorkomende spiermerker was die immunoreactief was in liposarcomen bij de hond, met reactiviteit in slechts 12% van de gevallen; in die gevallen was de immunoreactiviteit mild.
Bij de mens komen goed gedifferentieerd liposarcoom, gedifferentieerd liposarcoom en pleomorf liposarcoom tot expressie met spiermerkers.16 In deze studie brachten niet alleen goed gedifferentieerd liposarcoom, gedifferentieerd liposarcoom en pleomorf liposarcoom variabel spiermerkers tot expressie, maar ook 1 myxoïd liposarcoom bracht een spiermerker tot expressie (d.w.z. α-SMA); dit laatste is voor zover wij weten niet gerapporteerd bij humaan liposarcoom.14 Mouse double minute 2 homolog (MDM2) is een ubiquitine ligase waarvan de expressie is gerapporteerd in verschillende soorten neoplasma’s bij honden, waaronder hepatitische kliertumoren, mestceltumoren en melkkliercarcinomen. De immunohistochemische expressie van MDM2 wordt steeds vaker gebruikt in humane liposarcomen om maligniteit te bevestigen, aangezien deze marker bijna nooit tot expressie komt in goedaardige tumoren van vet. MDM2 is slechts positief in een subset van goed gedifferentieerde liposarcomen en gededifferentieerde liposarcomen en zou negatief moeten zijn in de meeste myxoïde liposarcomen en pleomorfe liposarcomen bij de mens.16 In een eerdere studie werd expressie van MDM2 gerapporteerd bij goed gedifferentieerd liposarcoom, gedifferentieerd liposarcoom en myxoïd liposarcoom bij de hond, en verscheidene liposarcomen die oorspronkelijk op basis van histomorfologie als goed gedifferentieerd liposarcoom waren ingedeeld, werden op basis van het ontbreken van MDM2-expressie geherclassificeerd als pleomorf liposarcoom.2 Hoewel MDM2 clustert met bepaalde liposarcoom-subtypes, is het niet immunoreactief in 100% van de goed gedifferentieerde liposarcomen en is het bijgevolg niet gevoelig voor de diagnose. Bij mensen wordt MDM2-expressie niet aanbevolen als bevestigende diagnose, maar als onderdeel van een IHC-panel om maligniteit en subtype te bepalen.16
Hoewel UCP1 traditioneel wordt beschouwd als een marker van bruin vetweefsel, is UCP1-expressie gerapporteerd in muizenhersenen; skeletspieren; thymocyten; pancreaseilandjescellen; gladde baarmoederspieren; wit vetweefsel van knock-out muizen met een defecte vitamine D-receptor; menselijke keratinocyten, zweetklieren, haarfollikels, talgklieren, pancreaseilandjescellen, en “beige” adipocyten; pancreaseilandjescellen van makaken; en rattentymocyten.1,13,17,20,22,23 In het licht van de diverse cellulaire expressie van UCP1, zijn nieuwe rollen voor UCP1 gesuggereerd, waaronder het helpen bij spiercontractiliteit en bescherming tegen oxidatieve stress.20,23 In deze studie was de expressie van UCP1 door neoplastische liposarcoom cellen en cellen met meerdere kleine cytoplasmatische vacuolen in controle wit vetweefsel bijzonder interessant. Recent onderzoek heeft aangetoond dat sommige cellen in wit vetweefsel UCP1 tot expressie brengen onder bepaalde omstandigheden, zoals blootstelling aan koude. Deze cellen die in staat zijn UCP1 tot expressie te brengen, worden beige adipocyten genoemd om ze te onderscheiden van bruine of witte adipocyten.10 Bovendien heeft een studie van humaan hibernoma aangetoond dat een subpopulatie van neoplastische bruine adipocyten differentiëren in witte adipocyten en een zwakkere en meer vlekkerige kleuring voor UCP1 vertonen dan bruine adipocyten.18 Dit suggereert dat sommige getransdifferentieerde neoplastische witte adipocyten wel immunoreactief zijn voor UCP1, maar een iets zwakkere immunoreactiviteit hebben dan hun bruine adipocytaire tegenhangers, wat een oorzaak kan zijn voor het zwakkere kleuringspatroon dat in de huidige studie in neoplastische cellen wordt gezien in vergelijking met andere gepubliceerde hibernoma studies bij honden. Een bijkomende reden voor de zwakkere immunoreactiviteit in deze studie in vergelijking met eerdere rapporten van hibernoma bij de hond is dat het UCP1 antilichaam in deze studie tot 1:100 werd verdund, maar in de andere rapporten van hibernoma bij de hond 5 maal meer geconcentreerd was.25,27 Het is in de huidige studie onbekend of UCP1 expressie door neoplastische cellen transdifferentiatie van witte adipocyten naar bruine adipocyten vertegenwoordigt, een afwijkende expressie van UCP1 in witte adipocyten, neoplastische transformatie van beige adipocyten, of een kruisreactie van het antilichaam tegen humaan UCP1 met een ander canine eiwit.
In het licht van het toenemend aantal potentiële rollen voor UCP1 en het toegenomen aantal celtypen dat UCP1 tot expressie kan brengen, moet immunoreactiviteit tegen dit antigeen met een bredere lens worden geïnterpreteerd, waarbij ook andere celtypen dan bruine adipocyten in aanmerking moeten worden genomen, met name in weefsel van honden. Dit is vooral van belang bij het maken van onderscheid tussen hibernomen en liposarcomen bij honden, die beide spiermerkers en UCP1 tot expressie brengen. Hibernomen zijn echter goedaardige tumoren en moeten het stellen zonder cellulaire atypie en andere kenmerken van maligniteit. In een recent rapport werd de diagnose gesteld van verschillende hibernomen in de retrobulbar bij de hond, gebaseerd op UCP1 expressie in alle gevallen en overvloedige mitochondriën die ultrastructureel werden geïdentificeerd in 1 geval. Echter, overvloedige mitochondriën zijn een prominent ultrastructureel kenmerk in de epithelioïde component van sommige humane pleomorfe liposarcomen,12 en UCP1 expressie werd geïdentificeerd in veel canine liposarcomen in deze studie. In het licht van de overlapping in ultrastructurele kenmerken en immunohistochemische profielen van hibernomen en liposarcomen, moet de histomorfologie worden gebruikt als de primaire differentiërende factor tussen liposarcomen en hibernomen bij honden, en moet de differentiatie van deze 2 neoplasma’s met voorzichtigheid worden uitgevoerd. Histologisch gezien zijn hibernomen tumoren van bruine adipocyten met grof, korrelig cytoplasma en centraal geplaatste kernen met een duidelijk lobulair patroon; mitotische figuren en cellulaire atypie zijn gewoonlijk afwezig.15 Geen van de neoplasma’s in deze studie had histologische kenmerken die consistent waren met hibernomen.
Het aandeel van liposarcomen bij honden in deze studie is vergelijkbaar met eerder gerapporteerde subtypen: het meest voorkomende subtype liposarcomen bij honden was goed gedifferentieerd liposarcomen, in afnemende frequentie gevolgd door pleomorf liposarcomen, myxoïde liposarcomen en gedifferentieerde liposarcomen.2 Goed gedifferentieerd liposarcoom is ook het meest voorkomende subtype van humaan liposarcoom, maar in tegenstelling tot bij de hond komen humaan myxoïd liposarcoom en dedifferentiated liposarcoom subtypes vaker voor dan pleomorf liposarcoom.16
Zachte weefselsarcomen maken tussen 7% en 15% uit van alle cutane en subcutane tumoren bij de hond. Een veel voorkomende hindernis bij de indeling en de prognose van deze tumoren is de moeilijkheid om het specifieke histologische type te bepalen.7 Omdat liposarcomen een gelijkaardig immunohistochemisch profiel hebben als rhabdomyosarcomen, kan een verkeerde diagnose leiden tot een onnauwkeurige prognose en ongeschikte behandelingsaanbevelingen. Dit is vooral belangrijk voor liposarcomen die histomorfologisch overlappen met rhabdomyosarcoom subtypes. Omgekeerd kunnen goed gedifferentieerde liposarcomen verkeerd gediagnosticeerd worden als hibernomen indien de diagnose uitsluitend gebaseerd is op UCP1 immunoreactiviteit, met een onderschatting van het risico.25 De bevindingen van deze studie verduidelijken het immunohistochemische profiel van liposarcomen en geven aan dat er overlap is in de expressie van verschillende spierantigenen en UCP1 tussen hibernomen, liposarcomen en rhabdomyosarcomen.