Zoals bij veel biochemische tests op bacteriën worden de resultaten van een indooltest aangegeven door een kleurverandering na een reactie met een toegevoegd reagens.
Een zuivere bacteriecultuur moet gedurende 24-48 uur in steriele tryptofaan- of peptonbouillon worden gekweekt voordat de test wordt uitgevoerd. Na incubatie worden vijf druppels Kovac’s reagens (isoamylalcohol, para-dimethylaminobenzaldehyde, geconcentreerd zoutzuur) aan de kweekbouillon toegevoegd.
Een positief resultaat blijkt uit de aanwezigheid van een rode of rood-violette kleur in de oppervlakkige alcohollaag van de bouillon. Een negatief resultaat is geel. Er kan ook een wisselend resultaat optreden, dat een oranje kleur als resultaat te zien geeft. Dit is te wijten aan de aanwezigheid van skatole, ook bekend als methylindool of gemethyleerd indool, een ander mogelijk product van tryptofaanafbraak.
De positieve rode kleur ontstaat als gevolg van een reeks reacties. Het para-dimethylaminobenzaldehyde reageert met de in het medium aanwezige indool tot een rode rosindoolkleurstof. De isoamylalcohol vormt een complex met de rosindoolkleurstof, waardoor deze neerslaat. De resterende alcohol en het neerslag stijgen vervolgens naar het oppervlak van het medium.
Een variatie op deze test met Ehrlich’s reagens (met ethylalcohol in plaats van isoamylalcohol, ontwikkeld door Paul Ehrlich) wordt gebruikt wanneer de test wordt uitgevoerd op niet-fermenteerders en anaëroben.
Indole-positieve bacteriën
Bacteriën die positief testen op het splitsen van indool uit tryptofaan zijn onder meer: Aeromonas hydrophila, Aeromonas punctata, Bacillus alvei, Edwardsiella sp., Escherichia coli, Flavobacterium sp., Haemophilus influenzae, Klebsiella oxytoca, Proteus sp. (niet P. mirabilis en P. penneri), Plesiomonas shigelloides, Pasteurella multocida, Pasteurella pneumotropica, Enterococcus faecalis, Vibrio sp., en Lactobacillus reuteri.
Indole-Negatieve BacteriënEdit
Bacteriën die negatieve resultaten geven voor de indole-test zijn onder andere: Actinobacillus spp., Aeromonas salmonicida, Alcaligenes sp., de meeste Bacillus sp., Bordetella sp., Enterobacter sp., de meeste Haemophilus sp., de meeste Klebsiella sp., Neisseria sp., Mannheimia haemolytica, Pasteurella ureae, Proteus mirabilis, P. penneri, Pseudomonas sp., Salmonella sp., Serratia sp., Yersinia sp., en Rhizobium sp.
De indooltest is een van de vier tests van de IMViC-reeks, waarmee wordt getest op de aanwezigheid van een darmbacterie. De andere drie tests zijn: de methylroodtest , de Voges-Proskauertest en de citraattest.