Comme de nombreux tests biochimiques sur les bactéries, les résultats d’un test à l’indole sont indiqués par un changement de couleur suite à une réaction avec un réactif ajouté.
Une culture bactérienne pure doit être cultivée dans un bouillon de tryptophane ou de peptone stérile pendant 24 à 48 heures avant de réaliser le test. Après incubation, cinq gouttes de réactif de Kovac (alcool isoamylique, para-Diméthylaminobenzaldéhyde, acide chlorhydrique concentré) sont ajoutées au bouillon de culture.
Un résultat positif se manifeste par la présence d’une couleur rouge ou rouge-violet dans la couche d’alcool superficielle du bouillon. Un résultat négatif apparaît jaune. Un résultat variable peut également se produire, montrant une couleur orange comme résultat. Cela est dû à la présence de skatole, également connu sous le nom de méthyl indole ou indole méthylé, un autre produit possible de la dégradation du tryptophane.
La couleur rouge positive se forme à la suite d’une série de réactions. Le para-diméthylaminobenzaldéhyde réagit avec l’indole présent dans le milieu pour former un colorant rouge rosindole. L’alcool isoamylique forme un complexe avec le colorant rosindole, ce qui entraîne sa précipitation. L’alcool restant et le précipité remontent alors à la surface du milieu.
Une variante de ce test utilisant le réactif d’Ehrlich (utilisant de l’alcool éthylique à la place de l’alcool isoamylique, mis au point par Paul Ehrlich) est utilisée lors de la réalisation du test sur des non-fermenteurs et des anaérobies.
Bactéries indole positives
Les bactéries dont le test de clivage de l’indole à partir du tryptophane est positif comprennent : Aeromonas hydrophila, Aeromonas punctata, Bacillus alvei, Edwardsiella sp., Escherichia coli, Flavobacterium sp., Haemophilus influenzae, Klebsiella oxytoca, Proteus sp. (pas P. mirabilis et P. penneri), Plesiomonas shigelloides, Pasteurella multocida, Pasteurella pneumotropica, Enterococcus faecalis, Vibrio sp, et Lactobacillus reuteri.
Bactéries négatives pour l’indoleEdit
Les bactéries qui donnent des résultats négatifs pour le test de l’indole comprennent : Actinobacillus spp, Aeromonas salmonicida, Alcaligenes sp, la plupart des Bacillus sp, Bordetella sp, Enterobacter sp, la plupart des Haemophilus sp, la plupart des Klebsiella sp, Neisseria sp, Mannheimia haemolytica, Pasteurella ureae, Proteus mirabilis, P. penneri, Pseudomonas sp, Salmonella sp., Serratia sp., Yersinia sp. et Rhizobium sp.
Le test Indole est l’un des quatre tests de la série IMViC, qui recherche la preuve de la présence d’une bactérie entérique. Les trois autres tests sont : le test au rouge de méthyle , le test de Voges-Proskauer et le test au citrate .
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