Wie bei vielen biochemischen Tests auf Bakterien wird das Ergebnis eines Indol-Tests durch einen Farbwechsel nach einer Reaktion mit einem zugesetzten Reagenz angezeigt.
Eine reine Bakterienkultur muss vor der Durchführung des Tests 24-48 Stunden in steriler Tryptophan- oder Peptonbrühe gezüchtet werden. Nach der Inkubation werden fünf Tropfen Kovacs Reagenz (Isoamylalkohol, para-Dimethylaminobenzaldehyd, konzentrierte Salzsäure) in die Kulturbrühe gegeben.
Ein positives Ergebnis zeigt sich durch das Vorhandensein einer roten oder rot-violetten Farbe in der oberflächlichen Alkoholschicht der Brühe. Ein negatives Ergebnis erscheint gelb. Es kann auch ein variables Ergebnis auftreten, das eine orange Farbe als Ergebnis zeigt. Dies ist auf das Vorhandensein von Skatol zurückzuführen, auch bekannt als Methylindol oder methyliertes Indol, ein weiteres mögliches Abbauprodukt von Tryptophan.
Die positive rote Farbe bildet sich als Ergebnis einer Reihe von Reaktionen. Der para-Dimethylaminobenzaldehyd reagiert mit dem im Medium vorhandenen Indol zu einem roten Rosindolfarbstoff. Der Isoamylalkohol bildet mit dem Rosindolfarbstoff einen Komplex, der ihn zur Ausfällung bringt. Der verbleibende Alkohol und das Präzipitat steigen dann an die Oberfläche des Mediums.
Eine Variation dieses Tests unter Verwendung des Ehrlich’schen Reagenzes (unter Verwendung von Ethylalkohol anstelle von Isoamylalkohol, entwickelt von Paul Ehrlich) wird verwendet, wenn der Test bei Nicht-Fermentern und Anaerobiern durchgeführt wird.
Indol-positive BakterienEdit
Bakterien, die positiv auf die Spaltung von Indol aus Tryptophan testen, sind: Aeromonas hydrophila, Aeromonas punctata, Bacillus alvei, Edwardsiella sp., Escherichia coli, Flavobacterium sp., Haemophilus influenzae, Klebsiella oxytoca, Proteus sp. (nicht P. mirabilis und P. penneri), Plesiomonas shigelloides, Pasteurella multocida, Pasteurella pneumotropica, Enterococcus faecalis, Vibrio sp, und Lactobacillus reuteri.
Indol-negative Bakterien
Bakterien, die negative Ergebnisse für den Indol-Test liefern, sind: Actinobacillus spp., Aeromonas salmonicida, Alcaligenes sp., die meisten Bacillus sp., Bordetella sp., Enterobacter sp., die meisten Haemophilus sp., die meisten Klebsiella sp., Neisseria sp., Mannheimia haemolytica, Pasteurella ureae, Proteus mirabilis, P. penneri, Pseudomonas sp, Salmonella sp., Serratia sp., Yersinia sp. und Rhizobium sp.
Der Indol-Test ist einer der vier Tests der IMViC-Serie, die auf den Nachweis eines enterischen Bakteriums prüft. Die anderen drei Tests sind: der Methylrot-Test , der Voges-Proskauer-Test und der Citrat-Test.