Beta-actina anticorpo – Un controllo che conta
beta-actina – una proteina di mantenimento
Perché la beta-actina è comunemente usata come controllo nei Western blot?
beta-actina e malattie umane
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beta-actina – una proteina housekeeping
L’actina è un componente importante del citoscheletro, con sei isoforme conosciute nei mammiferi. Quattro di queste isoforme sono espresse principalmente nelle cellule muscolari striate e lisce, mentre le isoforme beta-actina e gamma-actina sono espresse in modo ubiquitario. Anche se la beta-actina ha un peso molecolare di 42 kDa, la degradazione produrrà 35-38 kDa, ~ 30 kDa, 15 kDa, e altri frammenti tipici su un Western blot, di cui i frammenti 35-38 kDa sono i più comuni.
L’anticorpo monoclonale beta-actina della Proteintech (60008-1-Ig) (Figura 1) riconosce tutti i frammenti, mentre l’anticorpo 66009-1-Ig (Figura 2) può rilevare solo la lunghezza completa della beta-actina. La beta-actina è altamente conservata tra le specie. Tuttavia, la sequenza N-terminale è meno conservata tra le specie rispetto al C-terminale. Poiché l’immunogeno per 60008-1-Ig è la sequenza interna, questo anticorpo può riconoscere una vasta gamma di specie e può essere ampiamente utilizzato nella ricerca.
| Figura 1 | Figura 2 |
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| Figura 1. Analisi in immunofluorescenza di cellule HepG2 utilizzando 60008-1-Ig (anticorpo beta-actina) ad una diluizione di 1:50 e Rhodamine-marcato capra anti-mouse IgG (rosso). | Figura 2. Immunoistochimica di un vetrino di tessuto di cancro al colon umano incluso in paraffina utilizzando 66009-1-Ig (anticorpo beta-actina) ad una diluizione di 1:1000 (sotto lente 40x). Antigene mediato dal calore recuperato con tampone Tris-EDTA (pH9). |
Perché la beta-actina è comunemente usata come controllo nei Western blot?
I controlli di caricamento sono essenziali per una corretta interpretazione dei Western blot. Possono essere usati per normalizzare i livelli di proteina rilevati confermando che il caricamento delle proteine è lo stesso in tutto il gel. In Western blotting, la beta-actina (42 kDa) è comunemente scelta come controllo di carico a causa della sua espressione ampia e coerente in tutti i tipi di cellule eucariotiche e il fatto che i livelli di espressione di questa proteina non sono influenzati dalla maggior parte dei trattamenti sperimentali (Figura 3).Beta-Actin funziona come un “controllo di carico” per mostrare che quantità molto simili di proteine sono state caricate in ogni corsia. Questo è essenziale in alcuni sistemi sperimentali in cui potrebbe non essere possibile raccogliere sempre lo stesso numero di cellule per ogni campione, come quando si lavora con cellule primarie, campioni di tessuto o sistemi in cui si può alterare la sintesi proteica, la dimensione/numero delle cellule o l’apoptosi (1).
Figura 3
Figura 3. Analisi Western blot di beta-actina in vari tessuti e linee cellulari usando l’anticorpo Proteintech 66009-1-Ig ad una diluizione di 1:20000 (Tempo di esposizione: 10 secondi).
beta-actina e malattie umane
Beta-actina è stata implicata nella malattia della mano, del piede e della bocca dalla proteomica e nel linfoma diffuso a grandi cellule B (3, 4).
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| Nome dell’antigene | Catalogo No |
Applicazione |
PubMed |
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| alpha Actin | 23660-1-AP | ELISA, WB, IHC, IF, IP | 5 | |
| 11032-1-AP | ELISA, WB, IP | 1 | ||
| 23082-1-AP | ELISA, IHC, WB | 1 | ||
| alpha cardiac Actin-specific | 66125-1-Ig | ELISA, WB, IHC | 0 | |
| Actina muscolare liscia | 14395-1-AP | ELISA, IHC, IP, WB, FC, IF | 51 | |
| 23081-1-AP | ELISA, WB, IHC, IP | 5 | ||
| 55135-1-AP | ELISA, IHC, WB | 4 | ||
| gamma Actin | 11227-1-AP | ELISA, WB | 0 |
| Ladder proteici colorati per i vostri esperimenti WB | |
| Marker proteici pronti all’usoda usare (10-180 kDa) | Marker proteici ad ampio spettro pronti all’uso (3-245 kDa) |
| 10 proteine precolorate che coprono una vasta gamma di pesi molecolari da 10 a 180 kDa | 13 proteine precolorate che coprono una vasta gamma di pesi molecolari da 3 a 245 kDa |
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| Risoluzione della scala proteica precolorata in un gel Tris-glicina al 10-20% (SDS-PAGE). | Risoluzione della scala proteica precolorata in un gel Bis-Tris al 4-12% (SDS-PAGE) |
Campioni gratuiti disponibili per marker proteici regular range (10-180 kDA).