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Motility Test – Principle, Procedure, Use and Interpretation

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運動性とは、細菌に特有のプロペラ状のべん毛や、滑るように動く特殊な繊維によって、生物が自ら移動する能力のことである。 運動性のある細菌は、細胞膜や細胞壁から外側に伸びる糸状の運動器官である鞭毛を用いて移動する。 運動性は、長い間、微生物の重要な分類学上のツールであり、生物学的特性として認識されてきた。 鞭毛の存在は主に桿菌に見られるが、少数の鞭毛を持つ球菌も存在するため、腸内細菌科では運動性が同定の非常に重要な手段となっている。

目的

  • 細菌の運動性を測定する
  • 運動性のある細菌とない細菌を区別する

原理

細菌の運動性は主に半固体の寒天培地で発揮されます。 この目的のために主に使用される培地はSIM培地(Sulphide Indole Motility medium)で、硫黄還元、インドール生成、運動性という3つの異なるパラメータをテストする複合差動培地である。 この培地は非常に柔らかいため、運動性のあるバクテリアが容易に移動でき、曇りが生じる。 半固形の寒天培地の中央に接種菌を刺す。 バクテリアの運動性は、接種したラインから伸びる拡散した成長ゾーンによって明らかになる。 培地全体に増殖する菌もあれば、接種した線から伸びる小さな領域や結節を示す菌もある。

Media:

SIM Medium

カゼインの膵臓消化物20.0g、動物組織の消化物6.1g、寒天3.5g、Fe(NH4)2(SO4)2・6H2O 0.2g, Na2S2O3・5H2O 0.2g, pH 7.3 ± 0.2 at 25°C

方法

  1. 寒天培地上で培養している若い(18~24時間)培養液のコロニーに直針を接触させる
  2. チューブの中央部に1/3~1/2インチだけの深さまで1回刺す。
  3. 35°~37°Cで培養し、7日間毎日観察する。
  4. 接種したラインから拡散した成長ゾーンを観察する。

期待される結果

  • 陽性。
  • positive: 拡散した霞のような成長が培地全体に広がり、やや不透明になる。
  • negative: 拡散した霞のような成長が培地全体に広がり、やや不透明になる。

運動性試験

用途

  • 実験室で運動性に基づいて微生物を区別するために使用される。
  • 微生物の分類を行うために実施されます。
  • 運動性テストは病原体の特性評価に重要です。
  • このテストは、腸内細菌科の同定プロトコルによく採用されます。
  • 運動性テストは、グラム陽性球菌、腸球菌の種の区別にも使用されます。 Enterococcus faeciumとE. faecalisは非運動性ですが、E. gallinarumとE. casseliflavus/E. flavescensは一般的に運動性です。

制限事項

  • 一部の生物は、正確な判定を行うためにこの培地で十分な増殖を示さず、追加のフォローアップテストが必要です。
  • 完全な同定のためには、生化学的、免疫学的、分子的、あるいは質量分析的な検査を純粋培養のコロニーに対して行うことが推奨される。
  • 加熱、振盪、あるいはその他の外傷によって細菌の鞭毛が損傷を受けた場合、偽陰性反応が起こる可能性がある。
  • 運動性の弱い生物は偽陰性反応を引き起こす可能性があります。
  • 半固形培地を接種する際には、培地を接種するのに使用したのと全く同じ線に沿って接種針を外すことが重要です。 扇形の動きをすると、刺した線に沿って成長し、偽陽性の解釈になる可能性があります。
  1. Tille, P. M., & Forbes, B. A. (2014). Bailey & Scott’s diagnostic microbiology (Thirteenth edition.). ミズーリ州セントルイス。 Elsevier.
  2. Cappuccino J.G. and Sherman N. 2008. Microbiology: A Laboratory Manual, 8th ed. Pearson Benjamin Cummings, San Francisco, CA, USA.
  3. vlab.amrita.edu/?sub=3&brch=73&sim=697&cnt=1
  4. www.asmscience.org/content/education/protocol/protocol.3658
  5. https://catalog.hardydiagnostics.com/cp_prod/Content/hugo/MotilityTestMedia.htm

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