Anticorpo beta-actin – Um controlo que importa
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beta-actin – uma proteína de manutenção doméstica
Por que é que o beta-actin é vulgarmente usado como controlo em florações ocidentais?
beta-actina e doenças humanas
Produtos relacionados
h5>beta-actina – uma proteína doméstica
Actina é um componente importante do citoesqueleto, com seis isoformas conhecidas em mamíferos. Quatro destas isoformas são expressas principalmente em células musculares estriadas e lisas, enquanto as isoformas beta-actinas e gama-actinas são expressas ubiquitamente. Embora a beta-actina tenha um peso molecular de 42 kDa, a degradação produzirá 35-38 kDa, ~ 30 kDa, 15 kDa, e outros fragmentos típicos de uma mancha ocidental, dos quais 35-38 kDa fragmentos são os mais comuns.
O anticorpo monoclonal da beta-actina da Proteintech (60008-1-Ig) (Figura 1) reconhece todos os fragmentos, enquanto que o anticorpo 66009-1-Ig (Figura 2) só consegue detectar o comprimento total da beta-actina. A beta-actina é altamente conservada entre as espécies. No entanto, a sequência N-terminal é menos conservada entre as espécies do que a C-terminus. Uma vez que o imunogénio para o 60008-1-Ig é a sequência interna, este anticorpo pode reconhecer uma vasta gama de espécies e pode ser amplamente utilizado na investigação.
| Figure 1 | Figure 2 |
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| Figura 1. Análise imunofluorescente de células HepG2 usando 60008-1-Ig (anticorpo beta-actino) a uma diluição de 1:50 e IgG (vermelho) de cabra com rótulo de Rhodamina-anti-rato (vermelho). | Figura 2. Imuno-histoquímica da lâmina de tecido do cancro do cólon humano embebida em parafina usando 66009-1-Ig (anticorpo beta-actina) a uma diluição de 1:1000 (menos de 40x lente). Antigénio mediado por calor recuperado com tampão Tris-EDTA(pH9). |
Análise IF de ( -20°C Etanol) células fixas de HepG2 usando 60008-1-Ig (anticorpo beta actina) na diluição de 1:100 e Alexa Fluor 488-Conjugated AffiniPure Goat Anti-Mouse IgG(H+L)
Por que é que a beta-actina é vulgarmente usada como controlo em florações ocidentais?
Os controlos de carga são essenciais para uma interpretação correcta das florescências ocidentais. Podem ser utilizados para normalizar os níveis de proteína detectados, confirmando que a carga de proteína é a mesma em todo o gel. Em Western blotting, a beta-actin (42 kDa) é geralmente escolhida como controlo de carregamento devido à sua expressão ampla e consistente em todos os tipos de células eucarióticas e ao facto de os níveis de expressão desta proteína não serem afectados pela maioria dos tratamentos experimentais (Figura 3). Isto é essencial em alguns sistemas experimentais onde pode não ser possível recolher sempre o mesmo número exacto de células para cada amostra, tal como quando se trabalha com células primárias, amostras de tecido, ou sistemas onde se pode estar a alterar a síntese de proteínas, tamanho/número celular, ou apoptose (1).
Figure 3
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Análise ocidental de beta-actina em vários tecidos e linhas celulares usando o anticorpo Proteintech 66009-1-Ig a uma diluição de 1:20000. (Tempo de exposição: 10 segundos)
p>Figure 3. Análise ocidental de beta-actina em vários tecidos e linhas celulares usando o anticorpo Proteintech 66009-1-Ig a uma diluição de 1:20000 (Tempo de exposição: 10 segundos).br>
beta-actina e doenças humanas
Beta-actina foi implicada em doenças das mãos, pés e boca por proteómica e linfoma de grandes células B difusas (3, 4).
Produtos relacionados:
| Antigen Name | Catálogo No |
Application |
p>PubMed/td> |
| alpha Actin | 23660-1-AP | ELISA, WB, IHC, IF, IP | 5 |
| 11032-1-AP | ELISA, WB, IP | 1 | |
| ELISA, IHC, WB | 1 | ||
| alpha cardiac Actin-specific | 66125-1-Ig | ELISA, WB, IHC | 0 |
| 14395-1-AP | ELISA, IHC, IP, WB, FC, IF | 51 | |
| 23081-1-AP | ELISA, WB, IHC, IP | 5 | |
| 55135-1-AP | ELISA, IHC, WB | 4 | |
| gamma Actin | 11227-1-AP | ELISA, WB | 0 |
| Ready-Marcador de Proteína de Uso (10-180 kDa) | Marcador de Proteína de Amplo Alcance pronto a usar (3-245 kDa) /td> |
| 10 proteínas conservadas cobrindo uma vasta gama de pesos moleculares de 10 a 180 kDa | 13 proteínas conservadas cobrindo uma vasta gama de pesos moleculares de 3 a 245 kDa |
 |
 /td> |
| Resolução da escada de proteínas prescritas num gel de 10-20% de Tris-glycine (SDS-PAGE). | Resolução da escada proteica prescrita num gel de 4-12% Bis-Tris (SDS-PAGE).PAGE) |
Amostras livres disponíveis para marcador de proteína da gama regular (10-180 kDA).