Quarenta vacas leiteiras Holstein foram utilizadas para determinar a eficácia dos óleos linoleicos ou ricos em linolénicos para melhorar o C18:2 cis-9, trans-11 ácido linoleico conjugado (CLA) e C18:1 trans-11 (ácido vacínico; VA) no leite. O desenho experimental foi um desenho completo aleatório para 9 wk com medições feitas durante as últimas 6 wk. As vacas foram alimentadas com uma dieta basal contendo 59% de forragem (controlo) ou uma dieta basal suplementada ou com 4% de óleo de soja (SO), 4% de óleo de linhaça (FO), ou 2% de óleo de soja mais 2% de óleo de linhaça (SFO) à base de matéria seca. Os ácidos gordos totais na dieta foram 3,27, 7,47, 7,61, e 7,50 g/100 g nas dietas de controlo, SO, FO, e SFO, respectivamente. O consumo de alimentos, o rendimento de leite com correcção energética (ECM), e o ECM produzido/kg de consumo de alimentos foram semelhantes entre os tratamentos. As proporções de VA foram aumentadas em 318, 105, e 206% em gordura de leite de vacas nos grupos SO, FO, e SFO, em comparação com vacas no grupo de controlo. Aumentos semelhantes em C18:2 cis-9, trans-11 CLA foram de 273, 150, e 183% nos tratamentos SO, FO, e OVS, respectivamente. Em condições de alimentação semelhantes, os óleos ricos em ácido linoleico (óleo de soja) foram mais eficazes no aumento de VA e C18:2 cis-9, trans-11 ALC em gordura láctea do que os óleos contendo ácido linolénico (óleo de linhaça) em vacas leiteiras alimentadas com dietas de alta armazenagem (59% de forragem). Os efeitos da mistura de ácidos linoleico e linolénico (50:50) no aumento de VA e C18:2 cis-9, trans-11 ALC foram aditivos, mas não maiores do que quando alimentados separadamente. Aumentar a proporção de ácidos gordos saudáveis (VA e ALC) através da alimentação com óleo de soja ou de linhaça resultaria em leite com maior valor nutritivo e terapêutico.