Motilidade é a capacidade de um organismo se mover por si próprio por meio de flagelos de tipo hélice exclusivos de bactérias ou por fibrilhas especiais que produzem uma forma deslizante de motilidade. As bactérias móveis movem-se utilizando flagelos, fios como apêndices locomotores que se estendem para fora da membrana plasmática e da parede celular, quer seja um único flagelo ou múltiplos flagelos. A motilidade é há muito reconhecida como uma importante ferramenta taxonómica e característica biológica dos microrganismos. A presença de flagelos ocorre principalmente em bacilos, mas existem alguns cocos flagelados, pelo que a motilidade é um meio muito importante de identificação na família Enterobacteriaceae. Desde os primeiros tempos no campo da microbiologia, a capacidade de movimentação das bactérias tem sido utilizada como meio de diferenciação e classificação dos organismos.
Objectivo
- Para determinar a motilidade da bactéria.
- Para diferenciar entre bactérias móveis e não móveis.
Princípio
Motilidade por bactéria é demonstrada principalmente num meio de ágar semi-sólido. Em meio de ágar semi-sólido, as bactérias móveis ‘enxameam’ e dão um crescimento difuso que é facilmente reconhecido a olho nu. O meio utilizado principalmente para este fim é o meio SIM (Sulphide Indole Motility medium) que é um meio diferencial de combinação que testa três parâmetros diferentes, Redução de Enxofre, Produção Indol e Motilidade. Este meio tem uma consistência muito suave que permite que as bactérias móveis migrem rapidamente através deles causando nebulosidade. O inóculo é apunhalado no centro de um ágar semi-sólido profundo. A motilidade bacteriana é evidente através de uma zona difusa de crescimento que se estende para fora da linha de inoculação. Alguns organismos crescem ao longo de todo o meio, enquanto outros mostram pequenas áreas ou nódulos que crescem a partir da linha de inoculação. As bactérias não móveis só crescem no tubo de ágar macio e apenas na área onde são inoculadas.
Media:
SIM Medium
P>Pancreatic digest of casein 20.0g, Peptic digest of animal tissue 6.1g, Agar 3.5g, Fe(NH4)2(SO4)2-6H2O 0.2g, Na2S2O3-5H2O 0,2g, pH 7,3 ± 0,2 a 25°C
Método
- Tocar uma agulha direita numa colónia de cultura jovem (18- a 24 horas) crescendo em meio ágar.
- Stab uma vez a uma profundidade de apenas 1/3 a ½ polegada no meio do tubo. Certifique-se de manter a agulha na mesma linha em que entrou, pois é retirada do meio.
li>Incubar a 35°-37°C e examinar diariamente até 7 dias.li>Observar para uma zona difusa de floculação do crescimento fora da linha de inoculação.
Resultados esperados
- >li> Positivo: Crescimento difuso e nebuloso que se espalha pelo meio, tornando-o ligeiramente opaco.
- Negativo: Crescimento que se limita à linha da facada, com margens bem definidas e deixando o meio circundante claramente transparente.
Usos
- É utilizado para a diferenciação de microrganismos com base na motilidade num ambiente de laboratório.
- É realizado para atribuir classificação taxonómica aos organismos.
- Os testes de motilidade são importantes na caracterização dos agentes patogénicos.
- Os testes são frequentemente utilizados em protocolos de identificação na família Enterobacteriaceae
- O teste de motilidade é também utilizado para a diferenciação das espécies de cocos gram positivos, Enterococci. Enterococcus faecium e E. faecalis são não-móteis, enquanto E. gallinarum e E. casseliflavus/E. flavescens são geralmente motile.
Limitações
- alguns organismos não apresentarão crescimento suficiente neste meio para fazer uma determinação precisa, e são necessários testes de seguimento adicionais.
- É recomendada a realização de testes bioquímicos, imunológicos, moleculares, ou de espectrometria de massa em colónias de cultura pura para identificação completa.
- Reacções falso-negativas podem ocorrer se a flagela bacteriana for danificada devido a aquecimento, tremores, ou outros traumas. Tal choque ambiental tornará o organismo não móvel.
- Os organismos que são pouco móveis podem resultar em reacções falso-negativas.
- Quando se inoculam meios semi-sólidos, é importante que a agulha inoculante seja removida ao longo da mesma linha exactamente utilizada para inocular o meio. Um movimento de ventilação pode resultar em crescimento ao longo da linha da facada que pode resultar em interpretação falso-positiva.
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