Como muitos testes bioquímicos sobre bactérias, os resultados de um teste de indole são indicados por uma mudança de cor após uma reacção com um reagente adicionado.
Cultura bacteriana pura deve ser cultivada em triptofano estéril ou caldo de peptona durante 24-48 horas antes da realização do teste. Após incubação, cinco gotas do reagente de Kovac (álcool isoamílico, para-Dimetilaminobenzaldeído, ácido clorídrico concentrado) são adicionadas ao caldo de cultura.
Um resultado positivo é demonstrado pela presença de uma cor vermelha ou vermelho-violeta na camada de álcool superficial do caldo. Um resultado negativo aparece amarelo. Um resultado variável também pode ocorrer, mostrando como resultado uma cor laranja. Isto deve-se à presença de skatole, também conhecido como methyl indole ou methylated indole, outro possível produto de degradação do triptofano.
A cor vermelha positiva forma-se como resultado de uma série de reacções. O para-Dimetilaminobenzaldeído reage com o indole presente no meio para formar um corante vermelho rosindole. O álcool isoamílico forma um complexo com corante rosindole, o que provoca a sua precipitação. O álcool restante e o precipitado sobem então à superfície do meio.
Uma variação neste teste utilizando o reagente de Ehrlich (utilizando álcool etílico em vez de álcool isoamílico, desenvolvido por Paul Ehrlich) é utilizada quando se realiza o teste em não fermentadores e anaeróbios.
Bactérias Indole-PositivasEdit
Bactérias que testam positivo para clivagem do indole do triptofano incluem: Aeromonas hydrophila, Aeromonas punctata, Bacillus alvei, Edwardsiella sp., Escherichia coli, Flavobacterium sp., Haemophilus influenzae, Klebsiella oxytoca, Proteus sp. (não P. mirabilis e P. penneri), Plesiomonas shigelloides, Pasteurella multocida, Pasteurella pneumotropica, Enterococcus faecalis, Vibrio sp, e Lactobacillus reuteri.
Bactérias Indole-NegativasEdit
Bactérias que dão resultados negativos para o teste de indole incluem: Actinobacillus spp., Aeromonas salmonicida, Alcaligenes sp., a maioria Bacillus sp., Bordetella sp., Enterobacter sp., a maioria Haemophilus sp., a maioria Klebsiella sp., Neisseria sp., Mannheimia haemolytica, Pasteurella ureae, Proteus mirabilis, P. penneri, Pseudomonas sp, Salmonella sp., Serratia sp., Yersinia sp., e Rhizobium sp.
O teste Indole é um dos quatro testes da série IMViC, que testa a evidência de uma bactéria entérica. Os outros três testes incluem: o teste vermelho de metilo, o teste Voges-Proskauer e o teste do citrato .