You’ve probably heard of the Genetic Code or the Blueprint of Life; estes termos referem-se ao ADN. Todos os seres vivos, incluindo animais, plantas, e bactérias, têm ADN nas suas células. O ADN é uma molécula muito longa constituída por uma cadeia de nucleótidos e a ordem destes nucleótidos é o que torna os organismos semelhantes a outros da sua espécie e, no entanto, diferentes como indivíduos. Os genes são secções dentro desta longa molécula de ADN.
Para estudar o ADN, é preciso primeiro retirá-lo da célula. Em células eucarióticas, tais como células humanas e vegetais, o ADN é organizado como cromossomas numa organela chamada núcleo. As células bacterianas não têm núcleo. O seu ADN está organizado em anéis ou plasmídeos circulares, que se encontram no citoplasma. O processo de extracção de ADN liberta o ADN da célula e depois separa-o do fluido e proteínas celulares, ficando assim com ADN puro.
Os três passos básicos da extracção de ADN são 1) lise, 2) precipitação, e 3) purificação.
passo 1: Lise
Neste passo, a célula e o núcleo são quebrados para libertar o ADN no seu interior e existem duas formas de o fazer. Primeiro, as rupturas mecânicas abrem as células. Isto pode ser feito com um homogeneizador de tecido (como um pequeno misturador), com um almofariz e pilão, ou cortando o tecido em pequenos pedaços. A ruptura mecânica é particularmente importante quando se utilizam células vegetais, porque estas têm uma parede celular resistente. Em segundo lugar, a lise utiliza detergentes e enzimas como a proteinase K para libertar o ADN e dissolver as proteínas celulares.
p>passo 2: Precipitação
Quando se completa o passo da lise, o ADN foi libertado do núcleo, mas agora está misturado com partes celulares amassadas. A precipitação separa o ADN deste resíduo celular. Primeiro, os iões Na+ (sódio) neutralizam as cargas negativas sobre as moléculas de ADN, o que as torna mais estáveis e menos solúveis em água. Em seguida, adiciona-se álcool (como o etanol ou isopropanol) e faz com que o ADN se precipite para fora da solução aquosa porque não é solúvel em álcool.p>passo 3: Purificação
Agora que o ADN tenha sido separado da fase aquosa, pode ser enxaguado com álcool para remover qualquer material indesejável e detritos celulares remanescentes. Neste ponto, o ADN purificado é normalmente re-dissolvido em água para fácil manuseamento e armazenamento.
Expectativas de Nível de Grau Alasca visadas
SC1.1 O aluno demonstra uma compreensão de como a ciência explica as mudanças nas formas de vida ao longo do tempo, incluindo genética, hereditariedade, o processo de selecção natural e evolução biológica, reconhecendo que todos os organismos têm cromossomas feitos de ADN e que o ADN determina os traços.